Методика проведения балансового опыта

2.3 Методика проведения балансового опыта

Для изучения влияния различных дозировок комплексоната титана на переваримость и использование питательных веществ кормосмеси был проведен балансовый опыт в конце выращивания на 5 аналогичных по массе бройлерах, характерных для каждой группы, по методике ВНИТиП (143) и методу М. И. Дьякова (95). Продолжительность балансового опыта 13 дней, из которых 5 дней учетных.

Птица содержалась в отдельных клетках с сетчатым дном, под которым установлены каркасы из полиэтиленовой пленки для сбора помета.

В течение балансового опыта ежедневно учитывали количество съеденного корма, путем учета остатков корма от заданного и количество выделенного помета. Помет собирали дважды в день (утром и вечером), взвешивали, помещали в двойные полиэтиленовые пакеты (тщательно закрываемые), заливали 0,1 н раствором щавелевой кислоты (2 мл на 50 г помета) для связывания аммиака. Количество пошедшей кислоты учитывали при определении первоначальной воды. Помет хранили в холодильнике на нижней полке.

Химический анализ кормосмеси, помета проводили в межкафедральной лаборатории УГАВМ по общепринятым методикам, указанным выше. Азот кала определяли по методу М.И. Дьякова (95).

Коэффициенты переваримости, балансы азота, кальция и фосфора вычисляли по общепринятым методикам.

В конце балансового опыта у 5 бройлеров из каждой группы из подкрыльцовой вены была взята кровь утром и в течение 2 часов доставлена в отдел биохимического анализа межкафедральной лаборатории УГАВМ для исследования.

2.4 Методика лабораторных исследований

В межкафедральной лаборатории УГАВМ в цельной крови определяли:

глюкозу – глюкозооксидазным методом при помощи набора «Глюкоза – ФКД»(80). При окислении бета- Д – глюкозы кислородом воздуха под действием глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода, которая окисляет хромогенные субстраты в присутствии фенольных соединений с образованием окрашенного продукта, интенсивность окраски которого прямо пропорциональна концентрации глюкозы;

гемоглобин – гемоглобинцианидным методом при помощи набора химических реактивов для определения массовой концентрации гемоглобина крови (116). Гемоглобин при взаимодействии с железосинеродистым калием окисляется в метгемоглобин, образующий с ацетонциангидридом окрашенный гемоглобинцианид, интенсивность окраски которого пропорциональна содержанию гемоглобина;

подсчет эритроцитов и лейкоцитов – проводили в камере Горяева (80) путем подсчета клеток белой и красной крови соответственно в 5-ти больших квадратах и 5-ти полосах;

дифференцированный подсчет лейкоцитов (лейкограмма) – проводился в мазках крови окрашенных по методу Романовского – Гиза (69,79,130).

Из биохимических показателей в сыворотке крови по общепринятым методикам (8,28,69,80,102,116,117,120,151) определяли:

- общий белок – рефрактометрическим методом на рефрактометре типа «RL- 2», в основу которого положено определение показателя преломления исследуемого вещества. В сыворотке крови величина рефракции, в первую очередь, зависит от количества белка (80);

- белковые фракции – нефелометрическим экспресс методом (8), основанном на способности отдельных фракций белка осаждаться фосфатными растворами определенной концентрации;

- холестерин –при помощи набора «БИО-ЛА-ТЕСТ» (8). Холестерин в присутствии уксусного ангидрида и смеси уксусной и серной кислот дает изумрудно-зеленое окрашивание, интенсивность которого прямо пропорциональна его концентрации;

- общие липиды – фотоколориметрическим измерением оптической плотности жировой эмульсии, которая образуется при взаимодействии серной кислоты с экстрактом липидов, полученном при инкубации сыворотки крови и смеси Блюра (40);

b- липопротеиды - фотоколориметрическим методом по Бурштейну. В основе метода лежит реакция избирательного осаждения бета-липопротеидов гепарином в присутствии двухвалентных катионов (40);

аминный азот – по реакции с нингидрином. Аминокислоты при взаимодействии с нингидрином подвергаются окислению, при этом образуется соединение, окрашенное в фиолетовый цвет, интенсивность окрашивания при определенных условиях пропорциональна количеству свободных аминокислот (80);

кальций – трилонометрическим методом с индикатором флюорексоном по Вичеву и Каракашеву (151). Метод основан на различной прочности комплексных соединений, образуемых кальцием, флуорексоном и трилоном Б;

фосфор – определение в безбелковом фильтрате крови с ванадат-молибденовым реактивом (по Пулсу в модификации В.Ф. Коромыслова и Л.А. Кудрявцевой). Метод основан на том, что фосфор в безбелковом фильтрате дает лимонно-желтое окрашивание (151).

Микроэлементы крови - определяли методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии (137,138).

Для исследования минерального состава костяка брали левую и правую большеберцовые кости у 5-ти бройлеров из подопытных групп, в которых определяли золу, кальций, фосфор, микроэлементы по описанным выше методикам.

Мясную продуктивность определяли в конце опыта путем проведения контрольных убоев 5-ти цыплят-бройлеров из каждой группы по методике ВИЖ (117,144), ВНИТиП (147). При этом определяли предубойную, убойную массу, массу тушки, массу съедобных и несъедобных частей, внутреннего жира. Химический состав белого и темного мяса проводили по О.И. Маслиевой (95) и С.И. Матрозовой (97).

Калорийность мяса определяли расчетным путем по химическому составу и калорическим коэффициентам: 1 г жира = 9,3 ккал, 1 г белка = 4,1 ккал. Энергетическая ценность мяса (кДж) рассчитали исходя из того, что 1 ккал соответствует 4,186 кДж.

Ветеринарно-санитарную оценку мяса на органолептические и физико-химические показатели проводили на кафедре «Товароведения и экспертизы продуктов» УГАВМ по методике А.И. Сердюка и А.И. Пархаевой (23).

Экологическую чистоту продукции оценивали по результатам исследования мяса на содержание в нем никеля, меди, свинца методом атомно-абсорбционной спектрофотометрии (137,138)

Бактерицидное действие комплексоната титана на патогенную микрофлору кишечника птицы определяли методом бумажных дисков (121).

Влияние комплексоната титана на серологический контроль напряженности иммунитета при Ньюкаслской болезни птиц определяли с помощью реакции задержки гемагглютинации, по методике, разработанной Главным управлением ветеринарии 1979 года (103).