Нейропептиды и их обмен
Физико-химические свойства, субстратная специфичность и биологическая роль карбоксипептидазо-В-подобных ферментов
ФМСФ-ингибируемая карбоксипептидаза
Половые стероидные гормоны
Прогестерон
Методы исследования
Метод определения активности карбоксипептидазы Н
Распределение активности ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы в в гипоталамо-гипофизарно-надпочечниково-гонадной системе самцов и самок мышей
Активность карбоксипетидазы Н и ФМСФ-ингибируемой карбоксипептидазы при введении прогестерона в тканях самок мышей
Активность основных карбоксипептидаз у самцов мышей при введении тестостерона и прогестерона
Навигация
Методы исследования
Активность основных карбоксипептидаз в тканях мышей при введении тестостерона и прогестерона
168432
знака
5
таблиц
0
изображений
2.2. Методы исследования
2.2.1. Метод введения половых стероидных гормонов
При изучении влияния половых гормонов на КП Н и ФМСФ-ингибируемую карбоксипептидазу in vivo все препараты вводились внутрибрюшинно в виде растворов в оливковом масле. Вводимый объем был равен 0,1 мл. Дозы половых гормонов были следующими: 1) 3 и 30 мг на кг массы в случае пропионата тестостерона; 2) 1 и 10 мг на кг массы в случае прогестерона. Контрольным животным вводили равный объем оливкового масла. В работе использовали следующие группы животных.
| Группа | Пол | Вводимое вещество | Доза |
| 1 | Самки | Пропионат тестостерона | 3 мг на кг массы тела |
| 2 | Самцы | Пропионат тестостерона | 3 мг на кг массы тела |
| 3 | Самки | Пропионат тестостерона | 30 мг на кг массы тела |
| 4 | Самки | Прогестерон | 1 мг на кг массы тела |
| 5 | Самцы | Прогестерон | 1 мг на кг массы тела |
| 6 | Самки | Прогестерон | 10 мг на кг массы тела |
| 7 | Самцы | Оливковое масло | – |
| 8 | Самки | Оливковое масло | – |
| 9 | Самцы | – | – |
| 10 | Самки | – | – |
Животных декапитировали через 0,5, 4 и 24 часа после инъекции. Затем извлекали головной мозг, половые железы, надпочечники и помещали их в охлажденный до 4оС физиологический раствор (0,9% раствор хлорида натрия в воде). Все дальнейшие процедуры, если не оговорено иначе, проводили при 4оС.
Головной мозг тщательно очищали от оболочек, кровеносных сосудов и извлекали гипофиз и гипоталaмус.
Яичники и надпочечники тщательно очищали от жира.
Образцы тканей хранили при температуре -20оС не более одного месяца до использования.
Для исследования влияния половых гормонов на КП Н и ФМСФ-ингибируемую карбоксипептидазу in vitro гомогенаты тканей инкубировали с гормонами или оливковым маслом в течение 60 мин при 4оС. Концентрации гормонов соответствовали дозам при введении in vivo. Затем определяли активность ферментов как описано ниже.
Для определения активности ферментов образцы тканей взвешивали, а затем гомогенизировали в 50 мМ натрий-ацетатном буфере (pH 5,6), содержащем 50 мМ хлорида натрия в соотношении 1:400 (вес:объем).
Похожие работы
... нервной и эндокринной регуляции в организме // Усп. совр. биол. – 1981. – 19, № 3. – С. 380-382. 23. Вернигора А.Н., Бардинова Ж.С., Сметанин В.А., Генгин М.Т. Активность основных карбоксипептидаз в тканях самок крыс на разных стадиях эстрального цикла // Укр. биохим. журн. – 2003. – 75, № 5. – С. 99-102 24. Вернигора А.Н. Карбоксипептидаза Н мозга животных в норме и при действии стресс- ...
... о динамике изменения активности ферментов. ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 3.1. Исследование активности основных карбоксипептидаз в тканях крыс разного возраста, испытавших пренатальное воздействие этанола 3.1.1. Исследование активности карбоксипептидазы Н в тканях пренатально алкоголизированных крыс разного возраста Согласно данным дисперсионного анализа пренатальное воздействие ...
0 комментариев