Влияние селенита натрия и селенита цинка на артериальное давление и сопротивление мозговых сосудов в условиях экспериментальной патологии

5.5 Влияние селенита натрия и селенита цинка на артериальное давление и сопротивление мозговых сосудов в условиях экспериментальной патологии

Измерение артериального давления у животных проводили с помощью ртутного манометра, соединенного с катетером, предварительно имплантированным в сонную артерию. Для предотвращения свёртывания крови катетер заполняли раствором гепарина. Сопротивление сосудов мозга рассчитывали исходя из данных АД и МК у ишемизированных животных.

Артериальное давление как в контрольной серии экспериментов, так и в группе опытов с предварительным введением исследуемых соединений снижалось с первых минут наблюдения. В контрольной серии снижение АД было значительно меньше и к концу наблюдения составило 5,2%. В группе с предварительным введением селенита натрия (до ишемии мозга) к 60 минуте наблюдения АД снизилось на 19,6%. В опытах с предварительным введением селенита цинка снижение АД было менее выраженным и составило 14,8% к концу наблюдения.

При расчёте ССМ было отмечено, что внутрибрюшинное введение исследуемых соединений оказывало достоверное влияние на сопротивление мозговых сосудов в постишемическом периоде. На протяжении первых 10-15 минут после ишемии отмечалось достоверное снижение сопротивления мозговых сосудов с наиболее выраженным эффектом на 5 минуте на фоне селенита натрия и на 15 минуте - на фоне селенита цинка. К 30 минуте эксперимента ССМ начинало возрастать и на 60 минуте наблюдения было на 12,2% выше исходного уровня при предварительном введении селенита натрия. В меньшей степени к концу наблюдения увеличивалось ССМ. В опытах с предварительным введением селенита цинка степень увеличения ССМ была значительно ниже, чем в контроле (+5,6% и +41,1%, соответственно). Результаты проведённых исследований статистически обработаны и приведены в таблицах 25 - 27 и на рисунке 8.

Таблица 25 – Динамика изменения АД и ССМ у белых крыс в контрольной серии опытов в постишемическом периоде

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р≤0,05

Таблица 26 - Динамика изменения АД и ССМ у белых крыс в постишемическом периоде получавших селенит натрия в дозе 100 мкг/кг перед ишемией мозга (M±m, n=7, D%)

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р≤0,05

Таблица 27 - Динамика изменения АД и ССМ в постишемическом периоде у белых крыс, получавших селенит цинка в дозе 100 мкг/кг перед ишемией мозга (M±m, n=7, D%)

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р≤0,05

Примечание - достоверно относительно исходных данных, * р≤0,05

По оси абсцисс – время наблюдения в минутах; по оси ординат – изменение ССМ в процентах от исходного уровня

Рисунок 8 - Динамика изменения ССМ в постишемическом периоде у белых крыс получавших селенит натрия и селенит цинка перед ишемией мозга

Выводы по главе 5

1. Селенит натрия и селенит цинка в дозах 30 и 50 мкг/кг достоверно увеличивают продолжительность жизни животных в условиях нормобарической гипоксии с гиперкапнией.

2. Селенит натрия и селенит цинка увеличивали выживаемость животных в условиях циркуляторной гипоксии мозга в сравнении с контролем.

3. Селенит натрия и селенит цинка в дозе 100 мкг/кг значительно увеличивают устойчивость животных к тотальной ишемии мозга, вызванной критическими гравитационными перегрузками в кранио-каудальном направлении.

4. В условиях экспериментальной ишемии мозга исследуемые соединения при их профилактическом введении существенно изменяют динамику развития постишемических цереброваскулярных феноменов, уменьшают степень проявления реактивной гиперемии и тормозят развитие фазы невосстановления мозгового кровотока.

5. Общая гипотензия, характерная для постишемического периода несколько усиливалась при предварительном введении селенита натрия и селенита цинка. Расчёт ССМ показал, что при введении селенита натрия к 60 минуте наблюдения оно было примерно в 2 раза ниже, чем в контрольной серии опытов, а при введении селенита цинка к концу эксперимента ССМ было близко к исходному.

ГЛАВА 6 ИЗУЧЕНИЕ ПСИХОТРОПНОЙ АКТИВНОСТИ СЕЛЕНИТА НАТРИЯ И СЕЛЕНИТА ЦИНКА В УСЛОВИЯХ ТОТАЛЬНОЙ ИШЕМИИ МОЗГА

При сосудистой патологии мозга в клинике отмечается ряд расстройств его деятельности: нарушение поведения, памяти (в том числе, амнезия) эмоционального статуса, тревожные расстройства. Нарушения в онтогенезе нервно-психических процессов, прежде всего когнитивных, могут проявляться не сразу, а через длительный период после патогенетического воздействия. Однако при оказании помощи пациентам практически все системы лечения направлены на ликвидацию уже развившейся патологии, хотя часто церебральной катастрофе предшествует продолжительный период обратимых нарушений, когда ещё возможно превентивное воздействие. Формирование 50% от окончательного объёма инфаркта происходит в течение первых 90 минут с момента развития инсульта, 80% - в течение 360 минут, в связи с чем первые 3-6 часов получили название «терапевтического окна», внутри которого лечебные мероприятия могут быть наиболее эффективными. Время «доформирования» инфарктных изменений после НМК в каждом случае индивидуально и составляет от 3 до 7 суток [1].

Согласно данным литературы (М.В. Биленко, 1989, В.Б. Семенютин и соавт. 1997) окклюзия артерий мозга сопровождается значительной вариабельностью ишемических повреждений и степенью неврологического дефицита. Известно, что продольные гравитационные перегрузки при краниокаудальном векторе ускорения вызывают нарушения кровоснабжения головного мозга. Степень проявления цереброваскулярных нарушений зависит от величины и продолжительности перегрузки, а также от градиента её нарастания и спада, что позволяет их дозировать. Наряду с изменениями показателей мозговой гемодинамики у животных, подвергшихся воздействию гипергравитации, отмечаются изменения неврологического статуса, поведенческой активности и уровня эмоциональной тревожности.

Известно, что антиоксиданты обладают ноотропными свойствами. Учитывая выраженную антигипоксическую активность селенита натрия и селенита цинка представляло интерес изучить их влияние на обучаемость и процессы памяти, на двигательную, ориентировочно-исследовательскую, эмоциональную активность и координацию движений у животных, подвергшихся тотальной ишемии мозга.

6.1 Изучение влияния селенита натрия и селенита цинка на психоневрологический статус белых крыс, подвергшихся воздействию гравитационных перегрузок (профилактическое введение)

Продольные гравитационные перегрузки создавались центрифугой. В эксперименте использовались белые крысы массой 220-250г, выжившие после перегрузок. Животные были разделены на три исследуемые группы. Контрольную группу составили 7 крыс, получавших изотонический раствор, вторую группу – крысы, которым профилактически до перегрузок вводили селенит натрия в дозе 100 мкг/кг (8 животных). Третьей группе животных (11 крыс) за 10-15 минут до ишемии вводили селенит цинка в дозе 100 мкг/кг. В дальнейшем в каждой группе животных проводилась оценка психоневрологического статуса.

Оценку влияния селенита натрия и селенита цинка на двигательную, ориентировочно-исследовательскую и эмоциональную активность животных проводили в тесте «открытое поле». Установка представляет собой круг диаметром 80 см, с бортиком 20 см, разделённый на 8 радиальных секторов и одним в центре. Тестируемое животное помещали в центральный сектор, спиной к экспериментатору. В течение 3 минут наблюдения регистрировали число пересечённых секторов (двигательная активность), вставание на задние лапы и число пересечённых центральных секторов (ориентировочно-исследовательская активность), количество стереотипных движений (груминг), эмоциональную активность (дефекация, уринация).

Исследование проводили на второй, четвёртый и седьмой день после перенесённых перегрузок. Это позволило следить за динамикой изменений психоневрологического статуса ишемизированных животных.

Результаты проведённых исследований показали, что в постишемическом периоде в контрольных опытах отмечалось понижение двигательной активности, о чём свидетельствует уменьшение числа пересечённых секторов, снижение познавательной активности (уменьшение числа вертикальных стоек) крыс и их эмоционального состояния (уменьшение актов груминга и число дефекаций). Эти нарушения наиболее ярко проявлялись в течение первых дней после ишемии, а в последующие сутки несколько ослабевали. Селенит натрия и селенит цинка при их предварительном до ишемии введении повышали двигательную активность крыс, перенесших ишемию мозга. Более выраженный эффект оказывал селенит цинка, под влиянием которого значительно увеличивалось число пересечённых животными секторов. Профилактическое введение селенита натрия уменьшало у крыс число вертикальных стоек, стереотипных движений и не изменяло число дефекаций по сравнению с контролем, что свидетельствует о некотором снижении исследовательской и эмоциональной активности. Селенит цинка повышал ориентировочно-исследовательскую активность (увеличивал число стоек) и снижал уровень эмоционального состояния (уменьшал акты груминга и дефекаций) крыс в постишемическом периоде.

Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблицах 28 – 30.

Таблица 28 – Показатели психоневрологического статуса контрольной группы животных в постишемическом периоде

Таблица 29 – Показатели психоневрологического статуса у животных в постишемическом периоде предварительным введением селенита натрия (100 мкг/кг)

Примечание - достоверно относительно контроля, * р≤0,05

Таблица 30 – Показатели психоневрологического статуса у животных в постишемическом периоде с предварительным введением селенита цинка (100 мкг/кг)

Примечание - достоверно относительно контроля, * р≤0,05

Таким образом, полученные экспериментальные данные свидетельствуют, о том, что однократное введение селенита натрия и селенита цинка до ишемии оказало положительное влияние на организм животных в постишемическом периоде. В опытах с предварительным введением исследуемых веществ уменьшился уровень эмоциональной тревожности, увеличилась двигательная активность, а на фоне селенита цинка повышалась и познавательная активность животных по сравнению с контрольной группой.

Для изучения влияния исследуемых соединений на различные фазы памяти - обучение белых крыс проводили через 24 часа после ишемии в методике условного рефлекса пассивного избегания в модификации Буреш, Бурешова. В каждой группе животных проводили тест на воспроизведение УРПИ. При помещении крыс в экспериментальную установку регистрировали латентный период захода (ЛПЗ) крысы в тёмную камеру и время пребывания (ВП) в этой камере в течение 3 минут. Для изучения ЛПЗ и ВП в тёмном отсеке в динамике - исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после обучения животных.

Поскольку обучение животных проводилось после ишемии, а введение исследуемых соединений проводили до ишемии – это позволило судить о степени неврологических нарушений ишемизированных животных. В ходе экспериментов было установлено, что в контрольной группе животных отмечалось ухудшение процессов обучения и процессов воспроизведения памятного следа. Эти эффекты наиболее ярко проявлялись в первые дни наблюдения и несколько ослабевали к седьмому дню наблюдения. Селенит натрия и селенит цинка значительно увеличивали ЛПЗ и ВП. Однако выраженность эффекта селенитов была различной. Наиболее активным оказался селенит цинка. Изучаемые соединения у интактных животных способствовали сохранению навыка УРПИ. Эти данные позволяют сделать вывод, что нарушение памяти крыс, по-видимому, связано с ухудшением процессов фиксации обучения или консолидации памяти (переход кратковременной памяти в долговременную). Полученные экспериментальные данные статистически обработаны и представлены в таблицах 31 - 34.

Таблица 31 – Оценка ЛПЗ у белых крыс получавших селенит натрия и до ишемии мозга

Примечание - достоверно относительно контроля (интактные крысы), # - р≤0,05

Таблица 32 – Оценка ЛПЗ у белых крыс получавших селенит цинка до ишемии мозга

Примечание

1 достоверно относительно контроля (крысы перенесшие ишемию мозга), * - р≤0,05

2 достоверно относительно контроля (интактные крысы), # - р≤0,05

3 достоверно относительно селенита цинка (интактные крысы), $ - р≤0,05

Таблица 33 – Оценка времени пребывания белых крыс в тёмном отсеке у белых крыс, получавших селенит натрия до ишемии мозга

Примечание

1 достоверно относительно контроля (крысы перенесшие ишемию мозга), * - р≤0,05

2 достоверно относительно контроля (интактные крысы), # - р≤0,05

3 достоверно относительно селенита цинка (крысы перенесшие ишемию мозга), $ - р≤0,05

Таблица 34 – Оценка времени пребывания белых крыс в тёмном отсеке у белых крыс, получавших селенит цинка до ишемии мозга

Примечание

1 достоверно относительно контроля (крысы перенесшие ишемию мозга), * - р≤0,05

2 достоверно относительно контроля (интактные крысы), # - р≤0,05

3 достоверно относительно селенита натрия (крысы перенесшие ишемию мозга), $ - р≤0,05

Следующим этапом исследования была оценка координации движений в тесте «вращающийся стержень». Селенит натрия и селенит цинка вводили внутрибрюшинно, однократно, за 10-15 минут до проведения эксперимента в дозе 100 мкг/кг. В контрольных опытах в тех же условиях вводили физиологический раствор.

Крыс помещали на горизонтальный стержень диаметром 4 см, вращающийся со скоростью 3 об/мин. Неспособность животных удерживать равновесие на стержне в течение трёх минут рассматривали как проявление нарушения координации движений. Для изучения координации движений в динамике исследование проводили на 2, 4 и затем на 7 сутки после ишемии. Полученные экспериментальные данные статически обработаны и представлены в таблице 35 и 36.

Таблица 35 – Влияние профилактического введения селенита натрия на координацию движений белых крыс перенесших тотальную ишемию мозга

Примечание

1 достоверно относительно исходных данных с веществом, интактные крысы, & р≤0,05

2 достоверно относительно селенита цинка (крысы перенесшие ишемию мозга), $ - р≤0,05

Таблица 36 – Влияние профилактического введения селенита цинка на координацию движений белых крыс перенесших тотальную ишемию мозга

Примечание

1 достоверно относительно контроля (интактные крысы), # - р≤0,05

2 достоверно относительно селенита натрия (крысы перенесшие ишемию мозга), *- р≤0,05

3 достоверно относительно селенита натрия (интактные крысы), $ - р≤0,05

Проведённые эксперименты показали, что в постишемическом периоде в группе контрольных животных отмечалось ухудшение координации движений. Селенит цинка и селенит натрия значительно ослабляли вызванное ишемией нарушение координации движений, что проявлялось в увеличении времени удержания крыс на вращающемся стержне. Так, в контрольных опытах количество животных, удержавшихся на вращающемся стержне в течение 3-х минут, составило 42,9%. При предварительном введении селенита натрия и селенита цинка значительно повышался процент крыс, удержавшихся на стержне, и к концу недели эти показатели составили соответственно: 62,5% и 54,6%

Таким образом, после ишемии отмечались значительные нарушения координации движений животных. Однократное профилактическое введение селенита натрия или селенита цинка оказывало положительное влияние на данный показатель в постишемическом периоде.