3.2 Результаты посевов для выявление возбудителей брожения пектиновых веществ

Во всех трех пробирках наблюдается помутнение среды, выделение газа, небольшое пенообразование. При микроскопировании обнаружены крупные палочковидные спорообразующие бактерии в виде барабанной палочки, окрашенные в синий цвет, с хорошо различимыми неокрашенными спорами, что свидетельствует о присутствии предположительно Clostridium pectinovorum и Clostridium felsineum.

 

3.3 Результаты посевов в жидкую среду Омелянского для выявление возбудителей брожения целлюлозы

При осмотре накопительных культур со средой Омелянского через несколько суток в пробирках с разными пробами почвы получены следующие результаты.

Проба почвы №1 (ясеневый лес): появление неприятного гнилостного запаха, небольшое газообразование, помутнение среды, выпадение осадка белого цвета, появление на бумаге желтых пигментных пятен. При микроскопировании обнаружены длинные тонкие палочки с круглой спорой на конце, что свидетельствует о присутствии предположительно Clostridium omelianskii.

Проба почвы №2 (поле): появление неприятного гнилостного запаха, обильное газообразование, помутнение среды, пожелтение и разрушение бумаги в некоторых местах. При микроскопировании обнаружены длинные тонкие палочки с круглой спорой на конце, что свидетельствует о присутствии предположительно Clostridium omelianskii.

 

3.4 Результаты посевов на жидкую среду Виноградского

При осмотре накопительных культур со средой Виноградского через несколько суток в пробирках с разными пробами почвы получены следующие результаты.

Проба почвы №1 (ясеневый лес): четко видимые изменения, такие как помутнение среды, выделение пузырьков газа, образование пены, появление запаха уксусной кислоты. При микроскопировании капли жидкости накопительной культуры, окрашенной раствором Люголя, видны клетки с потемневшим содержимым и неокрашенными спорами, хорошо различимой на темном фоне. Это свидетельствует о присутствии в среде предположительно Clostridium pasteurianum.

Проба почвы №2 (поле): видимых изменений практически нет, за исключением небольшого, едва заметного, помутнения. Однако, при микроскопировании капли жидкости накопительной культуры, окрашенной раствором Люголя, обнаружены клетки с потемневшим содержимым и неокрашенными спорами, хорошо различимой на темном фоне, в небольшом количестве. Это свидетельствует о присутствии в среде предположительно Clostridium pasteurianum.

Таблица 1

Результаты посевов на среду Китт-Тароцци пробы №1 (килька в томатном соусе)

Температура Культуральные признаки Морфологические признаки
33°С Помутнение среды, появление желеобразного оранжевого осадка по всему столбику жидкости, газообразование, появление гнилостного запаха, разрушение печени. Мелкие Г«+» палочки, споры.
55°С Обильное газообразование, помутнение среды, появление желеобразного осадка по всему столбику жидкости, частичное разрушение печени, Длинные тонкие Г«+» палочки, гранулированные, иногда встречаются скопления Г«–» палочек.

При сравнении морфологических и культуральных признаков с данными в определителе бактерий можно сказать, что данные микроорганизмы предположительно Cl. perfringens , Cl. termoaceticum, Cl. nigrificans, Cl. termosaccharolyticum.

Таблица 2

Результаты посевов на среду Китт-Тароцци пробы №2 (кабачковая икра)

Температура Культуральные признаки Морфологические признаки
33°С Появление мути по всему столбику пробирки, полное разрушение печени, небольшое газообразование, Грамвариабельные кокки, извитые, Г«+» спорообразующие палочки в виде барабанной палочки.
55°С Появление желеобразной мути по всему столбику жидкости, небольшое количество пены на поверхности жидкости, частичное разрушение печени, слабое газообразование. Скопление тонких и очень длинных Г«+» палочки.

Также можно сказать о присутствии предположительно Cl. perfringens , Cl. termoaceticum и Cl. nigrificans.

Таблица 3

Результаты посевов на среду Китт-Тароцци пробы №3 (кишечник свежей рыбы)

Температура Культуральные признаки Морфологические признаки
33°С Помутнение среды по всему столбику жидкости, разрушение печени с выделением крови, обильное газообразование, появление пены на поверхности жидкости. Длинные бесспоровые Г«+» палочки, Г «–» кокки.
55°С Появление однородной желеобразной мути по всему столбику жидкости, небольшое газообразование, частичное разрушение печени. Тонкие длинные бесспоровые Г«+» палочки, скопление спорообразующих Г«+» палочек в виде барабанной палочки.

При сравнении морфологических и культуральных признаков с данными в определителе бактерий можно сказать, что данные микроорганизмы предположительно Cl. perfringens , Cl. termoaceticum и Cl. nigrificans.

Таблица 4

Результаты теста на каталазу

Объект Предположительный вид Результаты теста на каталазу Окончательный вид
Почва ясеневый лес

 Cl. pasteurianum, Cl. omelianskii

отрицательный

Cl. pasteurianum, Cl. omelianskii

Почва поле

Cl. omelianskii,

Cl. pasteurianum

отрицательный

Cl. omelianskii,

Cl. pasteurianum

Растительные волокна

Cl. pectinovorum,

Cl. felsineum

отрицательный

Cl. pectinovorum,

Cl. felsineum

Свежая рыба Cl. perfringens, Cl. termoaceticum, Cl. nigrificans отрицательный Cl.perfringens, Cl. termoaceticum, Cl. nigrificans
Консервы (мезофиллы) Cl. perfringens отрицательный Cl. perfringens
Консервы (термофилы) Cl. termoaceticum, Cl. nigrificans, Cl. termosaccharolyticum отрицательный Cl. termoaceticum, Cl. nigrificans, Cl. termosaccharolyticum

Выводы

Бактерии рода Clostridium выделены из следующих объектов:

– из почвы – Cl. pasteurianum (обладающий азотфиксирующими свойствами и вызывающий маслянокислое брожение), Cl. omelianskii, вызывающий брожение целлюлозы;

– из волокон растений Cl. pectinovorum и Cl. felsineum;

– из стерильных консервов мезофильные микроорганизмы Cl. perfringens, термофильные микроорганизмы Cl. termoaceticum, Cl. nigrificans, Cl. termosaccharolytic;

– из сырой рыбы Cl. perfringens , Cl. termoaceticum, Cl. nigrificans.


Список литературы

 

1.         Ассонов Н.Р. Микробиология. – 2-е изд., перераб. и доп. – М.: Агропромиздат, 1989. – 350 с.

2.         Воробьева Л.И. Промышленная микробиология. – М.: Высшая школа, 1989. – 293 с.

3.         Емцев В.Г. Некоторые вопросы морфологии и физиологии азотфиксирующих Clostridium. – М.: Колос, 1966. – 60 с.

4.         Зенова Г.М., Степанов А.Л. Практикум по биологии почв. Изд. Московского университета, 2002. – 120с.

5.         Инструкция 4.2.10-15-21-2 Микробиологические методы выделения и идентификации возбудителей при бактериальных пищевых отравлениях. Министерство здравоохранения Республики Беларусь, 2004. – 62 с.

6.         Методическое указание к лабораторным работам. Санитарно-микробиологический контроль консервного производства. – Астрахань: АГТУ, 1998. – 32 с.

7.         Нетрусов А.И. Практикум по микробиологии.– М.: Академия, 2005. – 600 с.

8.         Овруцкая И.Я., Погодяева А.Я. Микробиология и микробиологический контроль производства сухих картофельных и овощных продуктов. – М:. Легкая и пищевая промышленность, 1983. – 88 с.

9.         Пивоваров Ю.П., Королин В.В. Санитарно-значимые микроорганизмы. –М.: Издательство ИКАР, 2000. – 268 с.

10.       Практикум по микробиологии / Под редакцией Шильниковой В.К. – М.: Дрофа, 2004. – 256 с.

11.       Работнова И.Л. Общая микробиология. – М.: Высш. школа, 1966. – 271 с.

12.       Рогачева А.И. Микробиологический контроль консервного производства. – М.: Пищепромиздат, 1983. – 95 с.

13.       www. BOTOX.com

Приложение № 1

 

Рецепты основных питательных сред:

Среда Виноградского для анаэробных азотфиксаторов рода Clostridium

Глюкоза 20,0 г

К2НРО4 1,0 г

MgSO4 * 7H2O 0,5 г

СаСО3 20,0 г

NaCl 0,5 г

MnSO4 и FeSO4 следы

Вода дистиллированная 1000 мл

В среду рекомендуется вносить смесь микроэлементов по Федорову 1мл/л.

Среда Китт-Тароцци для мезофильных и термофильных анаэробных микроорганизмов

Для приготовления среды стерильные пробирки заполняют на 1,0–1,5 см кусочками печени, мяса или рыбы и заливают приготовленным мясо-пепетонным бульоном с глюкозой и агаром. В 1 дм3 мясо-пептоного, рыбо-пептонного или печеночного бульона вносят 10 г глюкозы и 1,5 г агара, который при нагревании постепенно расплавляют (высота слоя бульонав обычных пробирках 12–13 см, в высоких 15–18 см) и стерилизуют 20 мин при температуре (121±1) °С. Требуемую величину рН проверяют до и после стерилизации рН среды после стерилизации должно быть (7,1±0,1).

Мясо-пептонный бульон (МПБ)

Основой для приготовле6ния служит мясная вода, которую готовят следующим образом: мясо освобождают от костей жира и сухожилий, мелко нарезают или пропускают через мясорубку. 500 г полученного мясного фарша заливают 1 л водопроводной водой и оставляют для экстракции при комнатной температуре на 12 ч или в термостат при температуре 37–39°С на 2 ч, а при 50°С – на 1 ч. За это время из мяса экстрагируются различные вещества, в том числе водорастворимые витамины. Затем мясо отжимают через марлю, и полученный настой кипятят 30 мин. При этом свертываются белки. Остывшую массу фильтруют через ватный фильтр и доливают водопроводной воды до первоначального объема. К полученной мясной воде добавляют 1 % пептона и 0,5 NaCl. В случае необходимости добавляют углеводов в количестве 1–2 г на 100 мл. МПБ стерилизуют при 1 ати 20–30 мин.

Среда Омелянского для выделения возбудителей анаэрробного брожения целлюлозы.

МПБ 500 мл

стерильная вода 500 мл

мел 3 г


Информация о работе «Распространение микроорганизмов рода Clostridium в природе и пищевых продуктах»
Раздел: Биология
Количество знаков с пробелами: 81824
Количество таблиц: 8
Количество изображений: 0

Похожие работы

Скачать
218815
4
0

... группы – эксфолиативные токсины, вызывающие спецефическое поражение кожного покрова и энтеротоксины. Энтеротоксины. Классический взгляд на энтеротоксины обусловлен рассмотрением их в качестве причины тяжелых пищевых отравлений, вызванных поступлением в желудочно-кишечный тракт экзопродуктов стафилококкового происхождения предварительно накопившихся в продуктах питания (Wieneke et al., 1993). ...

Скачать
22423
0
1

... ; 2-водородокисляющие метаногены; 3-ацетатпотребляющие метаногены; 4-вторичные бродильщики; 5-ацетогенные бактерии. (Schink,1997). Данная схема применима и к анаэробным сообществам микроорганизмов, разлагающих аминоароматические субстраты. Разделение метаболических функций и их распределение среди метаболически разных микроорганизмов является компенсацией отсутствия ...

Скачать
113435
3
40

... два других отдела, отделенных мембраной, пирреллюлозому или рибоплазму, которая содержит рибосомы и связанные белки, и свободный от рибосом парафоплазму (Glockner, 2003). 3. Характеристика общих свойств микроорганизмов Микроорганизмы - это организмы, невидимые невооруженным глазом из-за их незначительных размеров. Этот критерий - единственный, который их объединяет. В остальном мир ...

Скачать
58541
1
2

... в какой последовательности и как глубоко учащиеся будут изучать материал. По программе Сивоглазова В.И., Сухова Т.С., Козлова Т.А. в книге для учителя «Биология: общие закономерности» тема «Биогеохимическая деятельность микроорганизмов» не рассматривается как самостоятельная на отдельном уроке, а является составной частью других тем. Например, на уроке по теме «Значение прокариот в биоценозах, их ...

0 комментариев


Наверх